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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉介紹

                                                                                         實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉介紹

麻醉(Anesthesia)從愛護(hù)動(dòng)物的觀點(diǎn)出發(fā),,為減輕其實(shí)驗(yàn)痛苦,利用物理或化學(xué)的方法,,使動(dòng)物的全身或局部暫時(shí)失去痛覺或痛覺遲鈍,,減少動(dòng)物的掙扎和保持安靜,以保證實(shí)驗(yàn)操作的進(jìn)行,。

麻醉的分類根據(jù)麻醉范圍主要分為全身麻醉和局部麻醉,,全身麻醉又分為吸入麻醉和非吸入麻醉。 

1. 全身麻醉:

吸入麻醉:又稱為氣麻,,將揮發(fā)性或氣體麻醉劑,,由動(dòng)物呼吸道吸入體內(nèi)而產(chǎn)生麻醉效果;大小鼠實(shí)驗(yàn)中常用乙醚異氟烷,、七氟烷等麻醉劑,;

非吸入麻醉:即注射麻醉,,包括肌肉、腹腔,、靜脈注射,,大小鼠實(shí)驗(yàn)中常用阿佛丁、戊巴比妥鈉,、水合氯醛和氯胺酮等麻醉劑,。

2. 局部麻醉:指通過(guò)麻醉藥阻斷機(jī)體某一部分的感覺神經(jīng)傳導(dǎo)功能,而運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)保持完好或同時(shí)有程度不等的被阻滯狀態(tài),。

下面就介紹幾種常見的麻醉劑的使用方法:

一,、吸入式麻醉  

起效快,恢復(fù)也快,,且麻醉的深度和維持時(shí)間易控制,,被認(rèn)為是嚙齒類動(dòng)物最可靠的麻醉方式。我們下面主要介紹2種常見的麻醉劑——異氟烷和乙醚,。

1. 乙醚(Diethyl ether)

特點(diǎn):為高度易揮發(fā)性液體,,被吸收后會(huì)廣泛抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng),操作簡(jiǎn)單,,見效快,;

操作方式:將被乙醚浸濕的消毒脫脂棉球或紗布放入燒杯(常用1000ml)內(nèi),將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入,,用塑料薄膜封口,,觀察,會(huì)發(fā)現(xiàn)動(dòng)物先開始興奮,,繼而出現(xiàn)抑制,自行倒下,。若實(shí)驗(yàn)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),,可將動(dòng)物固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,將含有乙醚的棉球靠近其鼻部,,保持吸入狀態(tài),;

缺點(diǎn):但其對(duì)呼吸系統(tǒng)有刺激性,可增加呼吸道分泌物,;若麻醉過(guò)深,,可導(dǎo)致動(dòng)物死亡;由于其會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有害,,且可能造成的操作人員危險(xiǎn)等原因,,目前使用相對(duì)較少[1]

適用實(shí)驗(yàn)由于起效和維持時(shí)間短,,僅5-10min,,主要用于短時(shí)間的淺麻實(shí)驗(yàn),,如大鼠眼眶取血等簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)。                 

2. 異氟烷 (Isoflurane)               

特點(diǎn):異氟烷為無(wú)色的澄明液體,,易揮發(fā),,具有輕微氣味;誘導(dǎo)和復(fù)蘇均較快,,加上不會(huì)影響動(dòng)物的生理指標(biāo),,在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用日趨廣泛;               

操作方式:一般使用時(shí)會(huì)配專用的吸入麻醉機(jī),,混合純氧進(jìn)行麻醉,,通過(guò)氧氣氣流使異氟烷揮發(fā),誘導(dǎo)麻醉一般使用2~3%的濃度,,維持使用1.5~2%,。一般在麻醉機(jī)連接一個(gè)麻醉罐子,如果單獨(dú)維持麻醉操作就使用面罩比較合適,。一般小鼠的麻醉時(shí)間為2~3min,,大鼠的麻醉時(shí)間為4~5min;

適用實(shí)驗(yàn):研究表明,,異氟烷麻醉能維持動(dòng)物的心率,、血氧分壓、血液pH等生理功能處于穩(wěn)定狀態(tài)[2],,適合情況復(fù)雜且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[3],,包括連續(xù)監(jiān)測(cè)動(dòng)物參數(shù)變化如成像技術(shù)、還有一些其他全麻藥不宜使用的疾病,,例如癲癇,、顱內(nèi)壓增高、重癥肌無(wú)力,、糖尿病等,。

二、注射式麻醉                 

一種既簡(jiǎn)單方便,,又能使動(dòng)物很快進(jìn)入麻醉期,,而無(wú)明顯興奮期的方法。水合氯醛,、戊巴比妥鈉,、阿佛丁和氯胺酮是目前大小鼠實(shí)驗(yàn)中最常用的注射類麻醉劑。 

1. 水合氯醛(Chloral hydrate)

特點(diǎn):有效的鎮(zhèn)靜催眠藥,,但本品麻醉劑量與中毒量很接近,,所以安全范圍小,使用時(shí)要注意;另外對(duì)皮膚和黏膜有較強(qiáng)的刺激作用,;

推薦用藥濃度及配比:一般配置濃度為4%~10%(質(zhì)量體積比,,4-10g溶于100ml滅菌水),大小鼠用藥量為:300~500mg/kg,。

2. 戊巴比妥鈉(Pentobarbital)

特點(diǎn):臨床上常用,,隨用量而產(chǎn)生鎮(zhèn)靜、催眠和抗驚厥效應(yīng),,大劑量時(shí)則產(chǎn)生麻醉作用,,常作為有效的鎮(zhèn)靜和麻醉劑。但它沒有鎮(zhèn)痛作用只有鎮(zhèn)靜作用,,因此手術(shù)前配合鎮(zhèn)痛劑使用效果會(huì)更好,;

推薦用藥濃度及配比:一般配置濃度為1%~3%,大小鼠用藥量為:40~70mg/kg,。

3. 阿佛�,。ˋvertin)

特點(diǎn):阿佛丁學(xué)名三溴乙醇,曾被推薦作為轉(zhuǎn)基因鼠傳代有關(guān)的外科手術(shù)(如胚胎移植和輸精管切除術(shù))的麻醉劑,;但配制較繁瑣,,保質(zhì)期較短,保存時(shí)要防菌,;      推薦用藥濃度及配比:一般配置濃度為1.2%-2.5%(100%濃儲(chǔ)液是10g阿佛丁與10mL 叔戊醇混合,,使用時(shí)加滅菌蒸餾水稀釋至1.2%-2.5%,4℃冷藏可保存2周,;大小鼠用藥量為:125~400mg/kg,。 

4. 氯胺酮(Ketamine)                  

特點(diǎn):一種鎮(zhèn)痛麻醉劑,注射后很快產(chǎn)生麻醉作用,,使動(dòng)物進(jìn)入淺睡眠狀態(tài),,麻醉的安全性相對(duì)較高;適用于各種表淺,、短小手術(shù)麻醉及全身復(fù)合麻醉,;  

推薦用藥濃度:大小鼠用藥量為:100~150mg/kg。

5. 舒泰50

一種進(jìn)口混合麻醉劑,,麻醉效果非常,價(jià)格較貴


三,、局部麻醉

局麻是指在手術(shù)的局部麻醉或者緩解局部疼痛和瘙癢時(shí)使用,,優(yōu)點(diǎn)是動(dòng)物在麻醉期間能保持清醒,對(duì)重要臟器功能干擾輕微,,麻醉并發(fā)癥少,,是一種較安全的麻醉方法。目前常用的局部麻醉劑有普魯卡因、利多卡因和丁卡因,。              

 注:局麻一般采用浸潤(rùn)麻醉方法,,操作時(shí),動(dòng)物固定好后,,首先在局部皮膚用皮頭針先作皮內(nèi)注射,,形成橘皮樣丘疹,然后換成局部麻醉長(zhǎng)針頭,,由皮點(diǎn)進(jìn)針,,放射到皮點(diǎn)周圍繼續(xù)注射,直到要求麻醉區(qū)域的皮膚都浸潤(rùn)為止,;可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作要求的深度按照皮下,、筋膜、肌肉,、腹膜或骨膜的順序,,依次注射麻藥,以達(dá)到麻醉神經(jīng)末梢的目的,。

 麻醉過(guò)程中常遇到的問題:              

1. 麻醉時(shí)需要注意什么,?              

  • 注意保溫:動(dòng)物在麻醉期間體溫易下降,可將動(dòng)物置于循環(huán)水恒溫墊上進(jìn)行保溫,; 

  • 注意觀察:使用麻醉劑過(guò)程中隨時(shí)檢查動(dòng)物的反應(yīng)情況,,如隨時(shí)觀察動(dòng)物的肌張力、角膜反射,、呼吸頻率,、夾痛反射等指標(biāo),避免動(dòng)物出現(xiàn)死亡,;

  • 注意給藥劑量:配制的藥液濃度要適中不可過(guò)高,,以免麻醉過(guò)急造成動(dòng)物死亡;但也不能過(guò)低,,以減少注入溶液的體積,。除參照一般標(biāo)準(zhǔn)外,還應(yīng)考慮個(gè)體對(duì)藥物的耐受性不同,,而且體重與所需劑量的關(guān)系也并不是絕對(duì)成正比的,。一般說(shuō),衰弱和過(guò)胖的動(dòng)物,,其單位體重所需劑量較小,。

2. 如何確認(rèn)動(dòng)物已完全麻醉?

以小鼠為例,,麻醉起效:小鼠仰臥時(shí)心跳及呼吸均勻,、肌肉松弛,、四肢無(wú)活動(dòng),胡須無(wú)觸碰反應(yīng),,踏板反射消失,,即視為達(dá)到完全麻醉狀態(tài)。若小鼠的前肢開始抖動(dòng)即判定為開始復(fù)蘇,。手術(shù)過(guò)程中如果發(fā)現(xiàn)動(dòng)物抽搐,、排尿,說(shuō)明麻醉過(guò)深,,應(yīng)立即進(jìn)行急救,。

3. 若小鼠出現(xiàn)復(fù)蘇跡象怎么辦?

若實(shí)驗(yàn)還沒有完成,,小鼠接近蘇醒,,需及時(shí)將麻醉瓶(氣麻)放在動(dòng)物口、鼻處,,給予輔助吸入麻醉或可臨時(shí)適當(dāng)補(bǔ)加麻醉劑,,一般每次補(bǔ)加劑量不超過(guò)注射總量的1/10~1/5。

4. 給藥方式一般除了腹腔注射還有哪些,?

非吸入麻醉常采用的注射方法有:靜脈注射,,肌肉注射,腹腔注射等,。靜脈與肌肉注射多用于較大的動(dòng)物,,如犬、貓,、豬,、犬等;靜脈注射的部位多是耳緣靜脈(家兔,、貓,、豬)、后肢靜脈(犬)及尾靜脈(大,、小鼠),;肌肉注射的部位多選用臀部。腹腔注射多用于較小的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,,如大鼠,、小鼠、沙鼠,、豚鼠等,。  

5. 吸入式麻醉和注射式麻醉如何選擇?            

  • 吸入麻醉的優(yōu)缺點(diǎn):較好的控制麻醉深度,,快速進(jìn)入麻醉狀態(tài),蘇醒迅速、平穩(wěn),,對(duì)肝,、腎功能影響輕微;但揮發(fā)性麻醉藥被人體長(zhǎng)期吸入后會(huì)對(duì)醫(yī)護(hù)人員造成身體上的傷害,,且每種揮發(fā)性麻醉藥的揮發(fā)罐的價(jià)格昂貴,。       

  • 非吸入麻醉的優(yōu)缺點(diǎn):操作簡(jiǎn)便,無(wú)需特殊的麻醉裝置,,與吸入麻醉相比成本較低,。但不能靈活掌握用藥的劑量、麻醉深度以及麻醉維持時(shí)間,,且麻醉藥物需要通過(guò)肝臟代謝,,腎臟排出,因此相比之下對(duì)肝臟和腎臟的影響較大,。

總之,,吸入麻醉麻醉藥安全性高,副作用低,,安全可控,;相比之下非吸入麻醉藥對(duì)呼吸、心率及血氧飽和度等指標(biāo)影響較大,,因此安全性相對(duì)較低,。在臨床上如果條件允許,吸入麻醉是最理想的選擇,。

參考文獻(xiàn)

[1] Ruizmeana M, Martinson E A, Garciadorado D, et al. Animal ethics in Cardiovascular Research[J]. Cardiovascular Research, 2012, 93(1): 1-3.           [2] Low L A, Bauer L C, Klaunberg B A, et al. Comparing the Effects of Isoflurane and Alpha Chloralose upon Mouse Physiology.[J]. PLOS ONE, 2016, 11(5).             [3]王洋,,陳克研,張賀,,等.丙泊酚靜脈麻醉與異氟醚吸入麻醉在巴馬小型豬實(shí)驗(yàn)中的比較[J].中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志,,2012,22( 7).             [4]湯宏斌.《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》(第三版)[M]. 湖北人民出版社,,2016.         [5]李 丹,,郭玉瑩,鄧 昊,,高 珊,,徐士欣. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉劑使用的福利倫理問題研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志2017, 27( 9).